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  • 使用固相萃取儀時的注意事項

    發布于 2023/02/15閱讀(572)來源 ltrlw

    摘要

    使用固相萃取儀時的注意事項

    內容

            我們在用固相萃取儀時,面臨的一個問題就是:液體應該以什么速率過柱流出,我的經驗是,要想效果好,就要慢,盡量慢。.
            對于固相萃取儀柱中的填料,我們如果局部放大地看,能夠看到其實它們是有很多的空際,液體流通的渠道很多,如果流得快,相當比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,給它們一個充分作用的機會。
            如何慢呢?一個竅門就是不要用配合抽氣機使用的所謂固相萃取儀器,而采用再普通不過的重力法。利用重力的作用使液體向下流出。在實驗速度上,重力法遠不如吸力法,但是在實驗效果方面,重力法遠比吸力法優勝,用吸力法只能得到譜帶吸附,用重力法卻能得到柱頭吸附,在速度和效果兩者的平衡中,我們還是傾向于優先保證好的效果。
            舉例來說,一個3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至篩板時間約為20分鐘,而在過樣品液時,25ml 的液體*多2小時可以流完,而且用重力法如果得當,工作速率不比吸力法差很多。因為我們可以充分利用空閑時間,用吸力法*須有人在旁邊守候,而重力法由于不需要用電,可以充分利用午休和晚上時間過柱,液體量大時接個堆疊接頭和延長管即可,安排好實驗步驟,工作效率一樣很高。另外,重力法不需要抽氣機和固相萃取儀器。
            在固相萃取儀條件選擇上,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不*如此。尤其在用重力法時,由于效率高,很多情況下是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅液體流出速度會更慢,而且在洗脫時的擴散會很明顯。
            因此建議,夠用就行,在能保證效率時,填料盡量少,加液也不宜多。
            固相萃取儀從原理上是色譜分離,但是在操作時*好只把它作為吸附萃取劑使用,由于填料性質、松緊常有差異,因此在實際實驗中不*因為追求效果的*佳化而設計出很復雜的洗脫程序。
            在建立條件中,我們應該盡量多利用現成的資料,盡快地建立起體系,同時要對操作過于復雜的步驟保持警惕性,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點。
            固相萃取柱*好只用一.次。因為從嚴格的意義上來說,很多物質的吸附是不可逆的,一次吸附, 無法洗脫,影響著下一次吸附,雖然有人做過重復利用的實驗,但是總體來說為了節省- -點經費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為。

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